弥漫大B细胞淋巴瘤(DiffuselargeBcelllymphoma，简称DLBCL)是成人中最常见的非霍奇金淋巴瘤。DLBCL可出现在几乎任何部位，在流式实验室经常会遇到。DLBCL常常会出现FSC的增加，但需要形态学结果共同建立DLBCL的诊断，同时和其他B细胞淋巴瘤进行鉴别。和其他B细胞淋巴瘤不同，DLBCL的免疫表型各种各样，表达CD5、CD10或都不表达，罕见病例也会都表达CD5和CD10。
流式检测DLBCL传统和较高的假阴性比例相关，这和快速的细胞更新、肿瘤坏死、样本处理过程中的差的细胞保存相关。下面将介绍最大化鉴定异常大B细胞群体的一些步骤。
DLBCL的FSC和SSC常常较正常淋巴细胞更大，因此常常在CD45/SSC或FSC/SSC图上被排除在传统的淋巴细胞门之外。因此，初始圈门策略需要注意不要排除肿瘤细胞，所有标本都应评估扩增的非特征性的大细胞群体。
DLBCL可能是高度增值的，因此为了optimizecellrecovery，应尽快处理样本。此外，尽管通过FSC/SSC图可以聚焦活细胞，但评估没有那么好活性的样本（FSC降低，SSC增高）可能会发现之前没有识别到的异常群体。
还需要注意的是流式的FSC和SSC也可能会误导，因为一些DLBCL只有稍微增加的FSC，一些低级别的伴随中等量胞浆的B细胞肿瘤的FSC和SSC会增加。因此，必须结合形态来明确DLBCL的诊断。
DLBCL是成熟B细胞肿瘤，表达CD45和B细胞的标志CD19和CD20，这些标志也可能会下调。至少有一项研究表明，CD20dimCD19bright的DLBCL和更差的生存相关。有趣的是，这些DLBCL病例中的CD20的免疫组化的结果是正常的，暗示流式提供了比免疫组化更精确的CD20强度的检测方法。DLBCL通常是表面免疫球蛋白阳性，允许通过流式细胞术演示克隆，但是部分亚群缺乏轻链的表达。
CD10+的异常成熟B细胞群体会引起CD10+的DLBCL、FL（滤泡淋巴瘤）、BL（Burkitt淋巴瘤）的鉴别诊断，通常需要形态去明确区分这三种疾病。但是，有些流式线索是很明显的。FL比DLBCL和BL的CD71表达强度低，FL的CD38通常也是低表达的，而CD38在BL中高表达，在DLBCL中可变表达。一些研究提出用CD54和CD44鉴别BL和DLBCL。CD44通常在BL中是阴性的，但是在CD10+的DLBCL中表达。WHO系统中一部分淋巴瘤被分类为，不可归类的，其特征介于DLBCL和BL之间。这类疾病的亚群有BCL2或BCL6重排和C-MYC重排。这个亚型侵袭性非常强，可能能通过表达CD10和可变降低的CD20和高表达CD38来预测。在CD5+的异常B细胞的病例中，需要对CD5+的DLBCL和MCL（套细胞淋巴瘤）进行鉴别。CyclinD1的免疫组化和、或t(11;14)的易位可以明确区分两者。CD5+的DLBCL通常预后较差。罕见DLBCL会出现非系别特异标志如CD8和CD56的表达，注意不要误分类为T细胞淋巴瘤或NK细胞淋巴瘤。
一些研究发现，在侵袭性的B细胞淋巴瘤中，评估脑脊液样本，流式比形态的敏感度更高，可能和流式能够检测更多的细胞和能鉴定更低浓度的细胞有关。因此，评估侵袭性B细胞淋巴瘤病人的疾病累及的脑脊液标本时应该包括流式。相似地，在一些没有疾病组织学证据的病例中流式发现了骨髓的累及。一项研究表明，免疫表型的疾病证据（流式或免疫组化）能够更好地预测预后，提高IPI（InternationalPrognosticIndex）预测生存的能力。Wood实验室的经验也是类似的，建议流式来评估DLBCL的骨髓分期。
Figure1:脖子肿物的芯针活检的流式检测
CD45/SSC图上可见一群扩增的红色群体，SSC较高，CD45比正常T细胞（绿色）强度低。红色群体的FSC增加，提示是较大的细胞，表达CD19，lambda轻链限制，提示红色群体是异常克隆的B细胞。红色群体的CD20是部分低表达，表达CD10，不表达CD5。尽管FL也会表达CD10，但红色群体的CD38比典型的FL表达强度更高，而细胞大小比低级别的FL大。此外，可变降低的CD20在FL中也不常见。CD10的表达和CD38的增加也会考虑BL，但是低水平的CD20不支持BL。考虑到CD10的表达和CD38的增加，不同程度的CD20下降是值得